化学发光免疫测定(CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。吖啶酯是较为理想的发光底物,在碱性环境中即可被过氧化氢氧化而发光。它是目前发展和推广应用最快的免疫分析方法,也是目前的标记免疫测定技术,灵敏度和度比酶免法、荧光法高几个数量级,可以完全替代放射免疫分析、彻底淘汰酶联免疫分析。主要具有灵敏度高、特异性强、试剂价格低廉、试剂稳定且有效期(6-18个月)、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单自动化程度高等优点。
用作标记的化学发光剂应符合条件:
1、能参与化学发光反应。
2、与抗原或抗体偶联后能形成稳定的结合物试剂。
3、偶联后仍保留高的量子效应和反应动力。
4、应不改变或极少改变被标记物的理化特性,特别是免疫活性。
鲁米诺类和吖啶酯类发光剂等均是常用的标记发光剂。
化学发光免疫分析中所使用的标志物分类:
1、直接化学发光剂,直接用化学发光剂标记抗原或抗体。
吖啶酯是目前常用的直接标记发光剂。
吖啶酯在碱性条件下被H2O2氧化时,发出波长为470nm的光,具有很高的发光效率,其激发态产物N-甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。吖啶酯类发光剂可直接用于标记半抗原和蛋白质等。用于标记抗体时,结合稳定,结合后并不减少光量子的产生,可获得高的比活性,有利于双位点化学发光免疫分析的建立。
2、酶促反应发光剂利用标记酶(辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)的催化作用,使发光剂(底物)发光。
辣根过氧化物酶催化的发光剂为鲁米诺及其衍生物。
鲁米诺及其衍生物 鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物都有化学发光特性。鲁米诺是最早合成的发光物质。
德晟是专业生产采血管添加剂、生物缓冲剂、显色试剂、化学发光试剂等体外诊断试剂原料的高新科技企业,可为客户提供的化学发光剂有鲁米诺、异鲁米诺、吖啶酯及鲁米诺单钠盐等。